Ni sư sinh ngày 20 tháng 5 năm 1940, tại Phường Sơn Phong, quận Hiếu Nhơn, Hội An. Ni sư là con của cụ ông Đỗ Thêm và cụ bà Nguyễn Thị Lý. Gia đình của Ni sư có 5 anh em, Ni sư là người con trửng trong gia đình. Với chí mộ đạo và lòng tu hành dâng trào nên năm 1956 (16 tuổi), Ni sư xin phép song thân đến xuất gia với Ni trưởng Bảo Quang. Ba năm đầu, Ni sư đã theo học tại chùa Sư nữ Hồng Ân – Huế. Năm 20 tuổi được Bổn sư cho phép thọ Sa-di-ni. Sau những năm tu học ở Huế, Ni sư sau đó đã rời chùa Hồng Ân và vào tu tại chùa Sư nữ Hội An. Khi Ni trưởng Bổn sư Bảo Quang vào Nhận chức Trụ trì Chùa Sư nữ Đà Nẵng, Ni sư đã xin Bổn sư cho nhập Ni chúng, để tòng tu tại Ni viện Bảo Quang – Đà - Nẵng.
Năm 1965, Ni sư Thích Nữ Diệu Định đã tu học tại Bảo Quang. Ngày mồng 3 tháng 6 năm 1966, trước sự nguy vong của Đạo Pháp và Dân tộc, và nhất là tình trạng đau thương của Miền Trung mà Đà Nẵng phải gánh chịu trong mấy tuần qua do Mỹ